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產(chǎn)品中心簡要描述:科研雞血紅蛋白(Hb)測定試劑盒ELISA吸附性能好、空白值低、孔底透明度高的固相載體。
產(chǎn)品介紹
品牌 | 軒澤康 | 貨號 | XZK-10447 |
---|---|---|---|
規(guī)格 | 96T,48T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 僅供科研 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
適應(yīng)種屬 | 人、大小鼠、兔、豬等 | 檢測樣本 | 血清、血漿、組織勻漿等 |
保質(zhì)期 | 六個月 | 特異性 | 不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng) |
重復(fù)性 | 板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15% | 靈敏度 | zui低檢測濃度小于1.0g/L |
特色服務(wù) | 免費代測,支持定制 |
上海軒澤康生物ELISA試劑盒種類繁多,根據(jù)產(chǎn)品名稱原理大致分為間接法、夾心法、競爭法、捕獲包被法(也稱為反向間接法,比較少見)。其中各類型試劑盒的基本原理可電詢我司業(yè)務(wù)人員進行詳細了解。以下是關(guān)于各類型ELISA試劑盒及適用類型:
①間接法:測定總抗體或IgG抗體
②抗體夾心法:測定二價或二價以上大分子抗原
③抗原夾心法:測定抗體
④抗體競爭法:測定抗體
⑤抗原競爭法:測定只有一個抗原決定簇的小分子半抗原
⑥捕獲包被法:測定IgM,傳染病的早期診斷
檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被血紅蛋白(Hb)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血紅蛋白(Hb)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
試劑的準備:20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法:
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
科研雞血紅蛋白(Hb)測定試劑盒ELISA操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
科研雞血紅蛋白(Hb)測定試劑盒ELISA實驗中問題解答:
【檢測的結(jié)果沒有吸光度值或吸光度值很低】
可能造成的原因:1.使用的試劑盒已過有效期 2. 沒有充分回溫、孵育的溫度太低
上海軒澤康生物為您解答:建議更換有效期以內(nèi)的試劑盒,使用同一批次試劑盒內(nèi)的內(nèi)容物并嚴格按照說明書步驟進行操作。在實驗操作的整個過程中仔細觀察恒溫箱的溫度。
【吸光度值偏高】
可能造成的原因:孵育溫度過高,反應(yīng)時間過長。
上海軒澤康生物為您解答:建議調(diào)整孵育環(huán)境的溫度,如無法調(diào)整室內(nèi)溫度請將顯色時間適當縮短,控制反應(yīng)時間。
【陰性樣本的吸光度值低】
可能造成的原因:酶標板孔中的試劑未充分的混和
上海軒澤康生物為您解答:注意操作的方法,注意洗滌時的方法。
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