檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被δ氨基乙酰丙酸脫水酶（ALAD）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的δ氨基乙酰丙酸脫水酶（ALAD）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品活性。

植物氨基乙酰丙酸脫水酶(ALAD)ELISA試劑盒組成：標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0、3、6、12、24、48 U/L

常見問題及解答：

【加樣問題】：加樣太快，無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加再孔壁上部的非包被區(qū)易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以加樣不可太快，要避免加在孔壁上部。

【邊緣效應(yīng)問題】：聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體，在實驗室的常規(guī)ELISA測定中，將板從室溫置于37℃恒溫箱，板也升溫時，在外周孔與中心孔質(zhì)檢可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液至板孔中時，將板和溶液均加熱至溫育溫度就可以很容易排除“邊緣效應(yīng)"問題，并且可以提高測定的重復(fù)性。

【空白對照】：是指不加標(biāo)本、不加酶做對照?？瞻讓φ赵趩尾ㄩL測量時顯得尤其重要。

植物氨基乙酰丙酸脫水酶(ALAD)ELISA試劑盒操作時需要注意的事項：

1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同，務(wù)必按照上海軒澤康生物所用產(chǎn)品說明書嚴格操作，否則實驗失敗后果自行承擔(dān)。

2. 我司僅對試劑盒本身負責(zé)，不對因使用試劑盒而造成的樣本消耗負責(zé)。請使用者在使用前合理考慮所需樣本量。

3.臨界值附近標(biāo)本波動為正?，F(xiàn)象，任何試劑均不可避免?？梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。

4.加樣時樣品量誤差，對于陰或很陽的標(biāo)本影響不大，但對閾值附近的標(biāo)本影響極大，建議校對加樣器。

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